Серологическая диагностика клещевого боррелиоза

Анализ крови на Боррелиоз: виды, когда сдавать, расшифровка

Клещевой боррелиоз (болезнь Лайма) – заболевание, передающееся через укус зараженного клеща. Вирус проникает сквозь гематоэнцефалический барьер, поражает центральную нервную систему (ЦНС).

Циркулируя по крови, проникает в ткани сердца, вызывая недостаточность органа. Болезнь определяют лабораторно, используя анализ на боррелиоз у человека и клеща.

Навигация по статье

Анализы на боррелиоз

Тестирование на боррелиоз проводят несколькими способами. Выбор зависит от наличия средств на покупку реактивов, подготовленности персонала, оснащенности лаборатории. Самые точные анализы крови на боррелиоз основаны на определении генотипа вируса:

  • хемилюминесцентный иммуноанализ;
  • иммуночип;
  • полимеразная цепная реакция.

Сущность анализа крови на боррелиоз

Анализы на энцефалит и боррелиоз специфичны, определяют возбудитель с высокой точностью. Биоматериалом является кровь или спинномозговая жидкость. Первая используется, если человек недавно был укушен клещом, инфекция не успела проникнуть в головной мозг. Ликвор исследуют, если у пациента присутствуют признаки болезни, но анализы отрицательны.

Когда нужно сдавать анализ на боррелиоз?

Каждый вирус и бактерия имеют набор ДНК, который выявляет иммуноанализ или ПЦР. Боррелиоз развивается не сразу, вирус циркулирует в крови несколько дней, прежде чем размножиться и попасть в ЦНС. Поэтому тест выполняют во временные промежутки, предписанные врачом.

Через 2-4 недели после укуса клеща сдают ИФА или ПЦР. Если исследование провести заранее, возможен ложноотрицательный результат. Для подтверждения диагноза сдают повторный тест.

Болезнь Лайма имеет несколько вариантов симптоматики в зависимости от стадии инфекции.

  1. Образование круговой эритемы вокруг места укуса. Она расширяется. Кожа становится красной, чешется, шелушится. Образуются участки омертвевшей ткани. Появляются вторичные эритемы.
  2. Отсутствие эритемы. Присутствуют признаки энцефалита. К ним относится лихорадка, интоксикация, симптомы невралгии.

В разгар болезни появляются признаки поражения ЦНС:

  • смена настроения от возбудимости до подавленности;
  • отсутствие чувствительности в верхних и нижних конечностях;
  • обильная рвота;
  • чувствительность к свету;
  • припадки по типу эпилепсии;
  • характерная поза для энцефалита (лёжа на боку с запрокинутой головой).

Подготовка к сдаче анализов

Тестирование является специфичным, определяется точные генотипы возбудителя, поэтому подготовки пациента не требуется. Его сдают в любое время суток. Исследование проводят до начала антибактериальной терапии или во время нее для проверки результата.

Если клещ доставлен в лабораторию с пациентом, его отправляют на проверку. Не рекомендуется самостоятельно отделять паразита, следует обратиться в травмпункт. Клеща помещают в пробирку, отправляют в лабораторию. Чем скорее проведут исследование, тем информативнее результат.

Методика исследования

Для анализа берут кровь из вены или спинномозговую жидкость с помощью прокола области между позвонками. Инфекция в жидкости не погибает, поэтому тест можно провести в течение 7 дней.

Если клещ только укусил человека, его можно обнаружить в суставной жидкости. Для этого используют метод пункции и забора синовиальной жидкости из сустава. Процедура болезненная, врачи советуют дождаться попадания возбудителя в кровь.

Сроки получения результатов

Анализ на боррелиоз относится к срочной категории. Чем раньше будет проведено лечение, тем меньше осложнений для пациента. Поэтому результаты выдают в день забора биоматериала.

Лабораторное подтверждение клещевого боррелиоза

Существует несколько методов исследования. Самым специфичным является иммуноферментный анализ на энцефалит и боррелиоз. Другие тестирования проводят при подозрении на ложноотрицательный результат.

ИФА: обнаружение антител

Самый часто используемый тест. В сыворотке крови определяют показатели иммуноглобулинов M и G. Точность исследования составляет более 90%. Для исключения ошибки проводят повторный анализ.

ПЦР методы

Метод ПЦР крови человека.
Используют для ранней диагностики заболевания. Определяют генотип вируса в активной и погибшей форме.

ПЦР клеща.
После укуса живое или мертвое насекомое доставляют в лабораторию. Определяют наличие ДНК возбудителя боррелиоза.

Иммуночип

Технология определения множества маркеров появления антигена боррелиоза в крови. Тест определяет наличие инфекции с высокой точностью, результаты получают быстрее, чем при других исследованиях.

Читайте также:  Лечение COVID-19 на дому кому оно показано и как все организовано

Серологические методы исследования

Для тестирования используют венозную кровь, которую сдают через 2-4 недели после укуса. Для предотвращения ложноотрицательного результата анализ повторяют через 1 месяца. Определяют количество антител только к патогенным микроорганизмам.

Методика вестерн блот

Применяют при подозрении на ложноотрицательный результат других исследований или при наличии антител к боррелиозу от предыдущего заболевания. Используют 10 антигенов боррелиоза, подбирая к ним антитела из крови пациента.

Расшифровка анализов

При расшифровке анализа на боррелиоз получают количественный или качественный результат. В первом случае выдается точное количество антител. Во втором – положительный или отрицательный анализ.

Оценка количественного исследования IgG:

  • меньше 10 единиц – пациент здоров, отсутствуют следы боррелиоза;
  • 10-15 – результат не точный, возможны остатки микроорганизмов от предыдущей болезни;
  • 15 и выше – положительный результат.

Оценка количественного тестирования IgM:

  • меньше 18 единиц – пациент здоров;
  • 18-22 – результат неточный;
  • 15 и выше – положительно.

При подборе точно выбранного антигена к антителу в организме человека результат бывает:

  • положительным;
  • сомнительным;
  • отрицательным.

Методика ПЦР выдает только положительный или отрицательный результат. Сомнительным он не бывает.

Проверка клеща на боррелиоз

При укусе клеща нежелательно самостоятельно снимать насекомое с поверхности кожи. Человек должен обратиться в травмпункт. Там его снимут по всем правилам, отправят в лабораторию на исследование. Список анализов идентичен человеческим. Лаборант выявляет ДНК инфекции с помощью анализа клеща на боррелиоз.

Ложноположительный результат

Возможно появление ложноположительного результата, если пациент раннее болел боррелиозом, сифилисом, мононуклеозом. Поэтому проводят 2-3 теста для исключения постановки ложного диагноза.

Для получения достоверной информации через 2-4 недели после укуса клеща назначают забор ликвора. При болезни инфекция находиться в спинномозговой жидкости в повышенных количествах.

Где можно сдать анализ на энцефалит и боррелиоз?

При укусе клеща люди не всегда знают, где сдать анализ на боррелиоз. Рекомендуется сдавать тест в больницах или поликлиниках. Там пациенту окажут первую помощь, безопасно извлекут насекомое из раны. Возможна сдача тестирования в частных лабораториях, но в них не всегда находятся терапевты, способные оказать первую помощь.

Боррелиоз – болезнь, вызывающая тяжелые осложнения для организма. Страдает нервная, сердечно-сосудистая, опорно-двигательная система. Самым тяжелым осложнением является гибель пациента. Поэтому важно вовремя обратиться к врачу, он расскажет, какие анализы сдать. Назначит лечение.

Анализ крови на RW: положительный и отрицательный анализ на сифилис

Анализ крови на сифилис: положительный, отрицательный ИФА

Анализ на ветрянку: можно ли сдать кровь, расшифровка результатов

Анализ крови на гепатит В и гепатит С, как обозначается и расшифровка результатов

Сколько времени делается ПЦР анализ на ВИЧ?

№AN304СИН, Боррелия (Borrelia burgdorferi sensu lato)

Срок исполнения

Исследуемый материал

Метод определения

Клещевой боррелиоз, или болезнь Лайма представляет собой трансмиссивное заболевание, вызываемое спирохетами Borrelia burgdorferi sensu lato, распространенное в Северной Америке, Европе и Азии. Болезнь поражает широкий круг видов млекопитающих, включая собак, и в настоящее время является самой распространенной трансмиссивной болезнью человека в США и Европе. Возможны инфицирование и сероконверсия у кошек, однако развития заболевания обычно не происходит.
Borrelia burgdorferi sensu lato представляет собой группу, в которую входят более 15 геновидов боррелий, некоторые из них не являются патогенными.
Боррелии не способны выживать в окружающей среде, поэтому они передаются между резервуарными хозяевами (млекопитающими, птицами и ящерицами) и переносчиками — кровососущими членистоногими. B. burgdorferi sensu lato передается клещами комплекса Ixodes ricinus-persulcatus, географическое распространение болезни Лайма соответствует ареалу клещей-переносчиков, а также животных-резервуаров инфекции.
В Европе наиболее значимыми резервуарными хозяевами боррелий являются мелкие грызуны, такие как белки, а также птицы, например, черные и певчие дрозды.
Было проведено полное секвенирование генома B. burgdorferi. На разных стадиях инфекции микроорганизм экспрессирует различные поверхностные липопротеины, что позволяет ему адаптироваться к различным условиям существования в организме членистоногих-переносчиков и млекопитающих-хозяев. Это свойство боррелий используется при разработке методов диагностики инфекции и вакцин против боррелиоза. Наиболее важными поверхностными протеинами являются OspA, OspC и VlsE. В течение осени, зимы и весны боррелии пребывают в состоянии покоя в нимфах клещей-переносчиков и экспрессируют протеин OspA, который позволяет им прикрепляться к поверхности средней кишки нимф. Когда клещ поглощает кровь млекопитающих поздней весной и летом, экспрессия OspA подавляется, и начинается экспрессия протеина OspC. После этого боррелии проникают в гемолимфу и слюнные железы клеща. OspC связывается с протеином слюнной железы клеща, что позволяет микроорганизму избежать действия факторов иммунного ответа хозяина. OspC также связывается с плазминогеном млекопитающих, что способствует распространению боррелий в организме хозяина-млекопитающего. При воздействии неблагоприятных факторов, таких как антибиотики, нутриентная депривация и изменения pH, в организме хозяина B. burgdorferi может принимать сферическую форму.
Считается, что для передачи инфекции клещ должен находиться в прикрепленном состоянии на животном-хозяине в течение минимум 24 часов, однако в некоторых случаях передача возможна и в течение более короткого времени. Боррелии размножаются в месте прикрепления клеща и распространяются по организму хозяина. Хотя в течение короткого времени боррелии могут быть обнаружены в крови, основным их местом размножения и распространения является, прежде всего, соединительная ткань. После инфицирования микроорганизмы могут находиться в организме собаки более одного года благодаря механизмам, позволяющим избегать действия факторов иммунного ответа.
В отличие от человека, болезнь Лайма у собак не сопровождается появлением сыпи на ранних стадиях течения заболевания. Примерно у 10% инфицированных собак наблюдаются выраженные клинические симптомы. Первые клинические проявления возникают у собак через 2-5 месяцев после укуса клеща и включают лихорадку различной степени выраженности, отсутствие аппетита, тромбоцитопению и хромоту, вызванную полиартритом.
У собак, инфицированных B. burgdorferi, может наблюдаться мембранопролиферативный гломерулонефрит, который чаще всего встречается у золотистых лабрадоров и лабрадоров-ретриверов. Предполагается, что в патогенезе нефрита при болезни Лайма играют роль иммунные механизмы, поскольку ДНК или антигены боррелий в биоптатах почки больных собак обычно не обнаруживаются. Клинические проявления, вызванные протеинурией и почечной недостаточностью, включают отсутствие аппетита, летаргию, снижение массы тела, рвоту, полиурию и полидипсию.
У собак с артритом при болезни Лайма наблюдаются летаргия, лихорадка, хромота, отеки и болезненность суставов, а также слабо выраженная генерализованная периферическая лимфаденопатия.
Сложность диагностики болезни Лайма является общеизвестной. У подавляющего большинства инфицированных собак болезнь протекает в субклинической форме, после чего антитела могут обнаруживаться у них в течение нескольких месяцев или лет. Диагноз должен ставится на основании клинических симптомов, данных анамнеза (проживание или временное нахождение в эндемичном регионе, даже при отсутствии информации об укусах клещей), обнаружения антител к B. burgdorferi и результатов исследования методом ПЦР. Метод ПЦР считается оптимальным для обнаружения микроорганизма. Метод ПЦР не позволяет дифференцировать живых, мертвых или нежизнеспособных боррелий.

Читайте также:  Осложнения и последствия простатита для мужчин чем грозит и к чему приводит воспаление простаты

ПРЕАНАЛИТИКА

Для исследования рекомендуется использовать образцы кожи (предпочтительнее, если образцы будут взяты как можно ближе к месту укуса клеща) или синовиальной оболочки, а также синовиальную жидкость ввиду большей вероятности обнаружения в них микроорганизмов у животных с хронической инфекцией, получавших и не получавших лечение. Другие биологические жидкости ввиду возможного получения ложноотрицательного результата исследовать не рекомендуется.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Метод ПЦР для обнаружения боррелиоза обладает рядом особенностей, которые ограничивают его использование. Точность исследования с помощью данного метода может зависеть от выбора праймеров, подготовки образцов, а также используемых методов экстракции.

ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций

Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).

ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза.

Tick-borne diseases, polymerase chain reaction, PCR, Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:

  • болезнь Лайма (клещевой боррелиоз), возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi;
  • анаплазмоз, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Anaplasma phagocytophilum.

В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещи Ixodess capularis, I. ricinus, I. pacificus и I. persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и I. persulcatus.

  • моноцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichia chaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.
Читайте также:  Читать Большая защитная книга здоровья - Степанова Наталья Ивановна - Страница 49 - ЛитМир

Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:

  • Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
  • Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.

Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.

Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций:

  • Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. Благодаря этому, метод ПЦР считается самым опитмальным способом диагностики острой инфекции.
  • Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3 % случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75 % случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E. chaffeensis и 90 % в отношении A. phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
  • Высокая специфичность (60-85 %). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.

Следует отметить ограничения метода ПЦР:

  • Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения.
  • Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при взятии образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.

В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.

Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.

Когда назначается исследование?

  • При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
  • при обнаружении у пациента с лихорадкой «лабораторных» признаков клещевых инфекций: панцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

  • боррелиоз (Borreliaburgdorferi), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlichiachaffeensis) и/или анаплазмоз человека (Anaplasmaphagocytophilum).
  • Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
  2. Swanson SJ, Neitzel D, Reed KD, Belongia EA. Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.
Ссылка на основную публикацию
Сергей Бубновский биография, личная жизнь, жена, дети
Сергей Бубновский — об авторе Информация Биография Бубновский Сергей Михайлович — доктор медицинских наук, автор методики профилактической кинезитерапии и работ...
Сельдь (селедка) польза и вред для организма
Целебные свойства иваси подтвердили исследования Специалисты ТИНРО-Центра организовали клинические испытания консервов из дальневосточной сардины (иваси). Тесты на добровольцах показали выраженный...
СЕЛЬДЬ полезные свойства и противопоказания
Сельдь – польза, химический состав и калорийность Сельдь – вид жирной морской рыбы, на которую просто необходимо обратить внимание из-за...
Сергей Кужугетович Шойгу, википедия, биография — Свободная Пресса — Сергей Шойгу биография, новости
Сергей Шойгу: биография, национальность, фото семьи и дружба с Путиным Сергей Шойгу – министр обороны РФ, в общей сложности более...
Adblock detector