Стрептококк группы В (Streptococcus agalactia), количественное определение ДНК, ПЦР

Streptococcus spp. (качественный метод)

Описание Показания Подготовка Интерпретация

Род Streptococcus spp. (стрептококки) – это шаровидные или яйцевидные грамположительные факультативно-анаэробные (не нуждающиеся в кислороде, но и не гибнущие в его присутствии) не образующие спор бактерии семейства Streptococcaceae, паразитирующие в организмах людей и животных. Местами их локации являются дыхательные пути, пищеварительная система (особенно рот, нос, толстый кишечник).

Стрептококки классифицируются по типу гемолиза (разрушения эритроцитов), наблюдаемого при росте бактерий на питательных средах, содержащих кровь животных, на:

  • альфа-гемолитические стрептококки (или «зеленящие» стрептококки), которые разрушают гемоглобин не полностью; при этом гемолитическая зона приобретает зеленоватый оттенок (откуда и взялось название);
  • бета-гемолитические стрептококки вызывают полное разрушение эритроцитов и, в свою очередь, в зависимости от особенностей строения делятся на группы, обозначенные буквами от A до U;
  • гамма – негемолитические стрептококки.

К патологически значимым стрептококкам относятся:

  • бета-гемолитический стрептококк группы А – Streptococcus pyogenes, локализующийся в глотке;
  • пневмококк Streptococcus pneumoniae, паразитирует в дыхательных путях человека, возбудитель пневмонии и бронхита;
  • энтерококки (стрептококки группы D) – Streptococcus faecalis, Streptococcus faecies, являются возбудителями септических процессов;
  • негемолитические и гемолитические стрептококки, вырабатывающие полисахариды, участвующие в образовании зубных бляшек и, и, предположительно, являющиеся причиной развития кариеса – Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans;
  • молочнокислый стрептококк Streptococcus lactis.

Болезни, возбуждаемые стрептококками, отличаются по степени тяжести и месту локализации. К их числу относятся:

  • внебольничная пневмония (воспаление легких, возникающее у людей, не имевших вообще или имевших очень мало контактов с медицинскими учреждениями);
  • менингит (воспаление оболочек головного и спинного мозга);
  • бронхит (воспаление бронхов);
  • пневмония (воспаление легких);
  • тонзиллит (ангина);
  • скарлатина (инфекционное заболевание, характеризуемое появлением мелкоточечной сыпи, лихорадкой, острой ангиной, общим отравлением);
  • фарингит (воспаление слизистой и лимфоидной ткани глотки);
  • риносинусит (воспаление слизистой носа и околоносовых пазух);
  • инфекции мягких тканей;
  • рожистое воспаление (острое, часто возобновляющееся инфекционное поражение кожи, характеризуемое покраснением ее участков на лице или голени и сопровождающееся общим отравлением организма);
  • стрептодермия (очень заразная бактериальная инфекция кожи, сопровождаемая образованием фликтен – поверхностных плоских образований, покрытых тонкой дряблой корочкой, наполненных сначала серозной жидкостью, а затем, по мере развития – гноем);
  • фасциит (воспаление соединительной ткани);
  • инфекции мочевого тракта;
  • гломерулонефрит (поражение почек, которое может проявляться развитием острой или хронической почечной недостаточности, нефритическим синдромом, изолированной гематурией (присутствием в моче крови без прочих симптомов заболевания или изменения в ее составе) и/или протеинурей (наличием белка в моче));
  • острая ревматическая лихорадка или ревматизм (системное заболевание соединительной ткани, поражающее сердечно-сосудистую систему, суставы, провоцирующее развитие кожного и неврологического синдромов у детей в возрасте 7-15 лет);
  • миозит (воспаление одной или нескольких скелетных мышц);
  • лимфаденит (увеличение лимфатических узлов);
  • пародонтит (воспаление тканей, окружающих зуб и удерживающих его в лунке ( альвеоле));
  • заеда (заболевание, поражающее слизистую оболочку и углы рта);
  • абсцесс (гнойное воспаление тканей, приводящее к их расплавлению и образованию гнойной полости, может поражать не только кожу и клетчатку, но и мышцы, кости, отдельные органы);
  • сепсис (опасное для жизни общее воспаление организма, вызванное попаданием бактерии в кровоток).

Особую опасность стрептококковые инфекции представляют для детей и пожилых людей. Заражение обычно происходит при личном контакте с инфицированным лицом либо же воздушно-капельным путем. Максимальное количество заболевших регистрируется в осенне-зимний период, когда сопротивляемость организма снижается и нередки случаи переохлаждения (это является одной из частых причин поражения инфекцией). Также инфицированию способствуют иммунодефицитные состояния, пристрастие к алкоголю или наркотикам.

Менингит, возникающий в результате заражения Streptococcus, не имеет возрастной избирательности и может поразить человека любых лет. У лиц с очень ослабленным иммунитетом велика вероятность развития таких болезней как:

  • синусит (воспаление слизистых околоносовых пазух);
  • отит (воспаление уха);
  • эндокардит (воспаление внутренней оболочки сердца);
  • перитонит (воспаление брюшины);
  • пиелонефрит (воспаление канальцевой системы почек);
  • гнойные инфекции;
  • сепсис.

В данном случае перечисленные выше заболевания имеют гематогенную природу, т.е. они возникают при попадании стрептококка в кровь и занесении ею бактерии в поражаемый орган.

Выявление специфических фрагментов ДНК Streptococcus spp. применяется для определения возбудителя инфекции:

  • в слюне и клетках эпителия ротоглотки – при пневмонии, фарингите, риносинусите, бронхите, тонзиллите;
  • в моче и сперме – при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы и почек.

Тестирование проводится методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Аналитические показатели теста:

  • исследуемый участок – специфический фрагмент ДНК, характерный для любых видов стрептококков, как определенно болезнетворных, так и условно-патогенных, возбуждающих заболевания только при наличии благоприятных для них факторов;
  • специфичность анализа – 100%;
  • чувствительность метода – 10 000 геном-эквивалентов в миллилитре.
  • для диагностики пневмонии (воспаления легких); бронхита (воспаления бронхов); фарингита (воспаления слизистой и лимфоткани глотки); тонзиллита (ангины); риносинусита (воспаления слизистой носа и околоносовых пазух);
  • при длительном, не поддающемся лечению мокром кашле, сопровождаемом субфебрильной (37,1-38,0⁰С) температурой;
  • при легочных заболеваниях, не сопровождаемых явными симптомами;
  • при обследовании пациентов с дефицитом иммунитета;
  • для установления причин развития инфекционного процесса мочеполовой системы;
  • для диагностики бактериемии (наличия бактерий в крови);
  • для определения причин развития эндокардита;
  • при гнойничковых поражениях кожи;
  • при поражении суставов после перенесенной ангины;
  • для оценки эффективности проведенного антибактериального лечения.
Читайте также:  Вены на груди и сосках у женщин перед месячными, во время беременности

Соскоб урогенитальный (цервикальный канал, влагалище, уретра)

Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.

Требования по подготовке к тестированию:

  • за день до и непосредственно в день отбора материала запрещено спринцевание влагалища;
  • накануне исследования запрещено применение вагинальных препаратов – мазей, свечей и т.п.

Проба не отбирается:

  • параллельно с приемом внутрь или местным применением антибиотиков – после окончания курса лечения должно пройти не менее двух недель при местной терапии и 30 дней после внутреннего приема антибактериальных препаратов;
  • во время менструации;
  • ранее, чем через 24-48 часов после полового контакта;
  • после внутривлагалищного УЗИ;
  • после колькоскопии (диагностического осмотра входа во влагалище, его стенок и шейки матки при помощи специального прибора – кольпоскопа);
  • после мануального исследования и прочих манипуляций.

Мочеиспускательный канал (уретра)

У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.

За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием всех медицинских препаратов. Если отказ от лечения невозможен, то пациенту необходимо поставить об этом в известность специалиста, направляющего его на обследование.

За 48 часов не вступать в половые контакты и не мастурбировать.

При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием или через 2-3 часа после него (при обильных выделениях из уретры у мужчин – через 1 час).

Сперма

Отбор материала с целью диагностики проводится до начала противобактериального, антивирусного и противопаразитарного лечения, химиотерапии, а также до лечебных или диагностических мероприятий в месте предполагаемой локализации агента инфекции. После курса лечения проба отбирается не ранее, чем через 10-14 дней при проведении локальной терапии и через 30 дней после перорального приема антибиотиков.

Сбор спермы (эякулята) проводится посредством мастурбации в стерильный медицинский контейнер, плотно закрывающийся крышкой. Проба не отбирается в ранее использовавшиеся и вымытые или обработанные средствами дезинфекции емкости. Не рекомендуется сдавать анализ при наличии обильных гнойных выделений из мочеиспускательного канала.

После сбора материал может храниться в холодильнике при температуре +2 — +8⁰С, но не более 10-12 часов.

На анализ собирается порция первой утренней мочи, выделенной не ранее, чем через 2-3 часа после предыдущего (ночного) мочеиспускания. Ее объем должен составлять порядка 20-30 мл. Емкость, используемая для сбора биоматериала – стерильный медицинский контейнер.

Моча собирается либо до проведения химиотерапии или лечения антибиотиками, либо через месяц после окончания курса лечения.

Перед началом манипуляции необходимо тщательно обмыть гениталии. Женщинам желательно воспользоваться гигиеническим тампоном во избежание попадания в пробу слизи из влагалища. Во время менструации материал не собирается.

После наполнения контейнера на треть-половину объема, емкость с мочой плотно закрывается крышкой, дабы избежать ее вытекания.

Доставка биоматериала должна быть организована в течение максимум 6 часов. До отправки в лабораторию моча может храниться как в холодильнике (при t⁰ от +2⁰С – замораживать ее нельзя), так и в комнате, но при этом температура не должна быть выше +25⁰С.

Соскоб эпителиальных клеток с задней стенки глотки

Перед отбором биологического материала необходимо учесть следующее:

  • соскоб клеток, отбираемый с целью диагностики, проводится перед началом применения противобактериальных, антивирусных и противопаразитарных лекарственных средств, а также до проведения любых лечебных или диагностических мероприятий;
  • отбор пробы для наблюдения за эффективностью проводимой терапии осуществляется минимум через полторы-две недели после окончания использования лекарственных средств местного действия и минимум через месяц после общего лечения.

Подготовка к взятию соскоба включает в себя:

  • запрет на применение препаратов для рассасывания и/или аэрозолей для орошения ротоглотки в течение 6 часов, предшествующих отбору пробы;
  • запрет на использование для освежения дыхания жевательной резинки или пастилки, а также на чистку зубов.

Перед проведением соскоба необходимо прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.

Для получения корректного результата тестирования все эти условия необходимо соблюсти в точности. Лечащий врач может рекомендовать иные условия проведения обследования.

Для проведения тестирования необходимо собрать порцию слюны. Сбор и транспортировка биоматериала осуществляется:

  • у взрослых – в стерильном контейнере (приобретается в аптеке);
  • у детей – в микропробирке без транспортной среды емкостью 2 мл.

Перед отбором пробы не рекомендуется:

  • применение орошающих и рассасываемых препаратов (минимум за 6 часов до обследования);
  • чистка зубов, освежение дыхания жвачкой или пастилкой.

Проведение химиотерапевтического или противобактериального лечения назначается после обследования или до него, но с окончанием курса терапии не менее чем:

  • за 10-14 дней (локальная терапия);
  • за 30 дней (общая терапия с применением пероральных антибиотиков).
Читайте также:  Иерсиниоз - причины, симптомы, диагностика и лечение

Прежде, чем отбирать слюну, необходимо трижды прополоскать рот, применяя для этого физиологический раствор или кипяченую воду.

Для отбора пробы у детей можно использовать шприц без иглы маленького объема. Для анализа достаточно половины микропробирки (1 мл). Слюна отбирается в защечном пространстве.

После сбора материала контейнер необходимо плотно закрыть крышкой. Микропробирка закрывается до щелчка.

Отобранный материал доставляется в лабораторию в день сбора. Если нет возможности отправить его сразу, необходимо поместить контейнер с образцом в холодильник и хранить его там при температуре от 2 до 8⁰С, но не дольше 10-12 часов.

Данный тест – качественный, результат выдается в формулировках «обнаружено» или «не обнаружено».

Нормой является отсутствие в исследуемой пробе специфических фрагментов ДНК Streptococcus spp.

  • в исследуемых образцах обнаружены специфические фрагменты ДНК Streptococcus spp., что свидетельствует об инфицировании бактерией.
  • специфические фрагменты ДНК Streptococcus spp. не обнаружены;
  • количество агента инфекции ниже порога обнаружения.

Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Методы проведения анализа на стрептококковую инфекцию

Инфекционные заболевания вызывают самые разные микроорганизмы, среди них немалую долю занимают бактерии. В частности, стрептококки. Это шаровидные, грамположительные, анаэробные бактерии, которые живут, преимущественно, на слизистых человека. Анализ на стрептококковую инфекцию назначают во многих случаях, это единственное средство выявить возбудителя при подозрении на бактериальную причину заболевания.

Роль диагностики

В каких случаях проводят диагностику? Прежде всего, при ангине и фарингите, некоторых других заболеваниях верхних дыхательных путей. Выявление бактерий проводится при инфекционных болезнях кишечника, в ряде случаев, при инфицировании мягких тканей, костей, сепсисе.

Кроме того, лабораторная диагностика стрептококковых инфекций назначается при подозрении на бактерионосительство, соскоб берется у сотрудников медицинских учреждений.

При внутрибольничной инфекции анализ на стрептококк проводится в обязательном порядке, наряду с выявлением других патогенных бактерий.

Анализы также делают при лечении антибиотиками, для оценки эффективности терапии. Может быть назначено обследование перед госпитализацией, в качестве профилактики.

Методы диагностики

Сегодня для выявления возбудителя могут использовать различные исследования. Наиболее часто используются такие методы:

  • бактериологический;
  • серологический;
  • экспресс-тестирование;
  • ПЦР-диагностика.

Каждый из этих методов имеет свою специфику и возможности, хотя в плане точности все они одинаково информативны.

Бактериологический метод

Он же называется посевом. При исследовании взятый у пациента биоматериал помещают в чашку Петри с питательной средой – смесью углеводов и нативного белка. Для посева используется три разных вида субстрата, каждый из которых подходит для определенного вида бактерий.

Далее чашки Петри помещают в специальный термостат и выдерживают в нем определенное время. После этого изучают результат – на питательных средах образуются колонии бактерий. Как правило, стрептококки образуют круглые колонии, которые могут быть матовым, блестящими или слизистыми – зависит от группы бактерий.

Такой анализ проводится для выделения отдельного возбудителя из группы – ведь в каждом биоматериале есть множество микроорганизмов, патогенных или нет. Понятно, что если колоний стрептококка больше всего, то и болезнь вызвана именно им.

Разновидность бактериологического анализа – анаэробиоз. Биоматериал помещают в пробирку с питательным бульоном, но без доступа кислорода. В этих условиях могут развиваться только анаэробные бактерии, к которым и относятся стрептококки. Преимущество в том, что сразу отсекаются все аэробные микроорганизмы, а это повышает точность диагностики и упрощает ее в несколько раз.

Серологический метод

Он тоже используется для определения инфицирования стрептококком, но во внимание берется не количество возбудителя, а количество антител к нему. Как известно, в организме человека к любому микроорганизму вырабатываются антитела, которые устраняют опасность. Чем больше их в крови, тем больше бактерий. На этом и основано серологическое исследование.

В случае со стрептококком определяется количество антител к стрептолизину типа О, который выделяется этими бактериями. Именно это вещество вызывает разрушение клеток организма человека.

В зависимости от выявленного количества антител можно понять не только причину заболевания, но и степень выраженности воспалительного процесса – чем их больше, тем больше стрептококков в организме.

Аббревиатура расшифровывается, как полимеразная цепная реакция. Это относительно новый метод, который славится своей точностью. Исследование основано на выявлении специфических фрагментов ДНК стрептококка. Если при исследовании обнаруживается та последовательность генов, которая характерна именно для этого возбудителя, сомнений не остается.

Каким образом это удается? ПЦР позволяет много раз создавать копии ДНК, с помощью фермента ДНК-полимеразы. При этом возможно выявить возбудителя на самых ранних стадиях заболевания, определить его количество в биоматериале. Метод действительно информативный, в этом плане он превосходит все другие.

Недостатком полимеразной цепной реакции является более высокая стоимость анализа, но она компенсируется исключительной точностью, что во многих случаях критично.

Быстрая диагностика

Если тест на стрептококк нужно сделать быстро, а такое требуется во многих случаях, оптимальным вариантом будет взятие мазка с последующей экспресс-диагностикой. Она позволяет поставить диагноз уже через 5 минут и не доставляет каких-либо серьезных неудобств.

Читайте также:  Хилак форте для мамы при грудном вскармливании

Как и с помощью чего проводится экспресс-тестирование? У пациента берут биоматериал (проводят в горле ватной палочкой). После этого палочку опускают в пробирку со специальным раствором, оставляют в нем на 1 минуту. Далее палочку вытаскивают, отживают в пробирку, после чего туда опускается тест-полоска, на 5 минут. Через это время оценивают результат.

Такое исследование не применяется повсюду, хотя оно и удобно, позволяет диагностировать инфекцию прямо в кабинете врача. Причина в том, что полоски для тестирования могут дать ложный результат. Поэтому даже если диагностика и проводилась, для уточнения диагноза все равно делают бакпосев.

Используемые биоматериалы

Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций может проводиться с применением:

  • мокроты;
  • носоглоточной слизи;
  • гноя;
  • смывов со слизистых;
  • отделяемого из раны;
  • мазка из влагалища;
  • спермы;
  • мочи;
  • кала.

Конкретный тип биоматериала определяется предположительным диагнозом – если есть подозрение на воспаление мочевого пузыря, то проводится анализ мочи, а если у грудничка явные признаки кишечной инфекции (жидкий стул, высокая температура), то бактерию определяют в кале.

Расшифровка анализов

Независимо от того, сколько лет пациенту, будет это взрослых, подросток или грудной ребенок, существует определённая норма содержания стрептококка в каждом виде биоматериала.

Самая распространенная диагностика стрептококковой инфекции – бакпосев. Оценка его результатов проводится методом подсчета. В норме содержание бактерий не должно превышать 10 в 4 или 10 в 7 степени, без разницы, подсчитываются концентрации стрептококков в слюне, мазке из зева или цервикального канала.

О патологии говорит концентрация выше, чем 10 в 7. При этом неважно, высевается стрептококк Агалактика или какой-либо другой, например, стрептококк Вириданс. Чем больше отличается количество бактерий от 7 степени, тем более выражен патологический процесс.

Ориентироваться стоит на следующие референсные значения:

  • отрицательный результат (нет роста бактерий) – отсутствие инфицирования;
  • положительный результат со значением до 10 в 7 – бессимптомное носительство;
  • положительный результат со значением более 10 в 7 – острая инфекция.

Нужно учитывать то, что на результаты исследования всегда влияет антибактериальная терапия, поэтому, если пациент принимал какие-либо препараты, об этом стоит знать. Впрочем, именно поэтому бакпосев используется для определения эффективности антибиотиков и чувствительности бактерий к ним.

Нужно ли лечение

Безусловно, если налицо воспалительный процесс, терапия необходима. В случае же носительства, которое протекает без каких-либо симптомов, необходимости в приеме антибиотиков определяется врачом исходя из количества выявленных микроорганизмов – если оно не превышает указанные выше показатели или намного ниже, можно обойтись и без лечения.

В тех случаях, когда количество бактерий приближается к верхней границе нормы, терапия проводится, особенно если существует подозрение на снижение иммунитета или существуют риски развития инфекции.

62-10-002. ДНК Streptococcus pyogenes (гемолитический стрептококк группы А), кровь

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A26.05.040.001 «Определение ДНК Streptococcus pyogenes (SGA) в крови методом ПЦР, качественное исследование»

Биоматериал: Кровь ЭДТА

Срок выполнения (в лаборатории): 5 р.д. *

Описание

Резервуаром для распространения Streptococcus pyogenes является только человек. Носителями микроба являются до 20 % населения. Передача инфекции от носителя чаще всего осуществляется воздушно-капельным путем.
Традиционно для подтверждения диагноза используется бактериологический посев. Но при всех плюсах этого исследования (особенно определение чувствительности антибактериальных препаратов к выделенному микроорганизму), данное исследование, все-таки сопряжено с длительностью — результаты будут готовы только через несколько суток. Это приводит к несвоевременной постановке диагноза, задержке в назначении специфического лечения, а значит более длительному лечению и развитию грозных осложнений.
Исследование методом ПЦР позволяет идентифицировать фрагменты ДНК как живого возбудителя, так и уже подвергшиеся частичному разрушению даже на фоне приема антибактериальных препаратов. Именно поэтому данный метод более предпочтителен.

Выявление ДНК Streptococcus pyogenes свидетельствует об инфицировании данным видом возбудителя.

Показания к назначению

  • дифференциальная диагностика возбудителя при симптомах острого фарингита;
  • дифференциальная диагностика возбудителя при симптомах тонзиллита;
  • дифференциальная диагностика возбудителя при симптомах стрептококкового поражения сердца;
  • дифференциальная диагностика возбудителя при подозрении на развитие кольцевидной эритемы;
  • диагностика гломерулонефрита;
  • дифференциальная диагностика возбудителя при симптомах пневмонии;
  • обследование пациентов с частыми эпизодами фарингитов, рецидивирующими тонзиллитами;
  • обследование членов семьи, в случае рецидивов явлений фарингитов и тонзиллитов;
  • при наличии факторов риска (младенческий и старческий возраст, лица, получающие иммунносупресивную терапию, получающие процедуру гемодиализа).

Подготовка к исследованию

Взятие крови проводится натощак или через 4 часа после еды. За сутки до исследования не рекомендуется принимать противовирусные и антибактериальные препараты. Ингибирующее действие могут оказывать гемоглобин, гепарин, билирубин и желчные кислоты, слизь, гормоны ферменты, соли, ионы металлов.

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Условия хранения и транспортировки: 24 часа при 2-8 °С

Примечания: После взятия крови аккуратно несколько раз перевернуть пробирку для лучшего перемешивания крови с консервантом. В случае невозможности доставки образца крови в лабораторию в течение 24 часов для увеличения срока хранения образца необходимо провести центрифугирование пробирки (3500-4000 об/мин в течение 5 минут), плазму не отбирать! Отцентрифугированный образец рекомендуется хранить и транспортировать при +2. +8 °С в строго вертикальном положении.

Взятие крови проводится натощак или либо через 4 часа после еды из удобного венозного доступа ( октевая вена). Взятие биоматериала осуществляется в соответствующий вакутейнер.

Ссылка на основную публикацию
Стоматологическая клиника Дента-Эль на метро Отрадное отзывы, фото, цены, телефон, адрес и как добра
Стоматологическая клиника "Дента-Эль" (филиал на ул. Хачатуряна) Адрес 127562, Москва, ул. Хачатуряна, д. 12, кор. 1 , Отрадное район метро...
Статья «Беременность и изжога»
Как в домашних условиях быстро понизить кислотность в желудке Многие годы безуспешно боретесь с ГАСТРИТОМ и ЯЗВОЙ? «Вы будете поражены,...
Статья «Головокружение, нарушение устойчивости и координации движений»
Кружится голова после сна с утра и шатает Если у человека регулярно возникает головокружение по утрам – это тревожный симптом....
Стоматологическая клиника Невская Стоматология на метро Елизаровская отзывы, фото, цены, телефон и а
Отзывы про стоматологию Невская Стоматология 3.0 22 отзыва 75 место в рейтинге Адрес г. Санкт-Петербург, ул. Ольминского д.4 Район Невский...
Adblock detector